塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增技术

(RPA)

实时荧光检测方法

的建立

樊晓旭

;

王志亮

;

哈登楚日亚

;

王英丽

;

王姣

;

刘春菊

;

迟田英

;

赵永刚

;

张志诚

;

吴晓东

【摘

要】

塞尼卡谷病毒

(Seneca valley virus,SVV)

可感染猪

,

引起类似口蹄疫病毒

感染造成的水疱性病变

,

新生仔猪病死率达

30%~70%.

本研究利用重组酶聚合酶扩

增技术

(RPA),

针对

SVV 3D

基因设计了引物和探针

,

并进行筛选、反应条件优化以

及敏感性、特异性和重复性试验

,

建立了实时荧光

RPA

方法

.

结果显示

,

本方法在

40℃、

10 min

内检测的最低浓度为

28

拷贝/μL;与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁

殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应

;

通过

3

次重复试验检测

2.8×106~2.8×101

拷贝/μL

的

6

个稀释度样品

,

在荧光强度达

1500 mV

所需时间变异系数范围在

2.44%~14.95%.

该等温、快速扩增方法为猪

群出现水疱性疾病的鉴别诊断提供了技术支持

,

对及时采取适当防控措施具有重要

意义

.

【期刊名称】

《中国动物检疫》

【年

(

卷

),

期】

2017(034)008

【总页数】

6

页

(P81-86)

【关键词】

塞尼卡谷病毒

;

实时

;

荧光

;

重组酶聚合酶扩增

【作

者】

樊晓旭

;

王志亮

;

哈登楚日亚

;

王英丽

;

王姣

;

刘春菊

;

迟田英

;

赵永刚

;

张志诚

;

吴

晓东